1- گروه انگل و قارچ شناسی، دانشگاه علوم پزشکی زاهدان، زاهدان، ایران ، samanekhabisi@gmail.com 2- گروه انگل و قارچ شناسی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران
چکیده: (1224 مشاهده)
زمینه و هدف: روش‌های پارازیتولوژیک جهت تشخیص فاسیولیازیس دارای محدودیت‌هایی از جمله؛ دفع متناوب تخم انگل، طولانی بودن مرحله حضور تخم انگل در مدفوع می‌باشند. هم‌چنین روش‌های سرولوژی بر پایه شناسایی آنتی بادی‌های ضدانگل، قادر به تشخیص عفونت‌های گذشته از عفونت‌های جدید نیستند، لذا تشخیص کوپرو آنتی‌ژن‌های انگل در مقایسه با سایر روش‌های تشخیصی قابل اعتمادتر می‌باشند. بنابراین هدف از این مطالعه تعیین و تشخیص کوپروآنتی ژن‌های فاسیولا با استفاده از آنتی‌بادی‌های پلی‌کلونال تولید شده بر علیه آنتی‌ژن دفعی ترشحی فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا بود. روش بررسی: در این مطالعه تجربی که در سال 1396ـ 1395 انجام شد، کرم‌های بالغ فاسیولا از کبد دام‌های آلوده جمع‌آوری شدند و با روش مولکولی هضم آنزیمی تعیین گونه شدند. آنتی‌ژن دفعی‌ـ ترشحی از هر دو گونه فاسیولا تهیه گردید. به منظور تولید آنتی‌بادی پلی کلونال 2 خرگوش برای هر آنتی‌ژن ایمیونیز شدند. آنتی‌بادیIgG تولید شده با روش کروماتوگرافی میل ترکیبی تخلیص و با آنزیم پراکسیداز کونژوگه گردیدند. کوپروآنتی‌ژن‌ها از 99 نمونه مدفوع دامی شامل؛ 30 نمونه آلوده به فاسیولا، 39 نمونه مبتلا به سایر بیماری‌های انگلی و30 نمونه سالم تهیه گردیدند. در این مطالعه 2 سیستم ساندویچ الیزا با استفاده از آنتی‌بادی‌های پلی کلونال تولید شده جهت شناسایی کوپرو آنتی‌ژن فاسیولا طراحی و ارزیابی شدند. ویژگی‌های آماری تست‌ها با استفاده از نرم‌افزار مدیکال کلکلتور 3، 4، 16 محاسبه گردیدند. ضریب کاپا و بررسی هم‌خوانی بین تست‌های ساندویچ الیزا محاسبه شد. یافته‌ها: تست ساندویچ الیزا با استفاده از آنتی‌بادی‌های پلی‌کلونال تولید شده بر علیه آنتی‌ژن دفعی‌ـ ترشحی فاسیولا هپاتیکا و فاسیولا ژیگانتیکا به ترتیب حساسیت و ویژگی 67/96، 86/89 درصد و 67/96، 3/91 درصد را نشان دادند. هم‌چنین توافق بالایی) 9/0< ضریب کاپا) بین آنتی‌بادیی‌های پلی کلونال تولید شده بر علیه هر دو گونه فاسیولا جهت تشخیص فاسیولیازیس مشاهده گردید. نتیجه‌گیری: در مجموع یافته‌ها نشان دادند که آنتی بادی‌های پلی‌کلونال تولید شده بر علیه آنتی‌ژن‌دفعی ـ ترشحی هر دو گونه فاسیولا دارای کارایی مناسبی جهت شناسایی کوپرو آنتی‌ژن‌های فاسیولا و تشخیص فاسیولیازیس می‌باشند.
