1- مرکز تحقیقات علوم اعصاب شیراز، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران 2- گروه فیزیولوژی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران ، keshtgar@sums.ac.ir 3- مرکز تحقیقات سالمندی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران
چکیده: (1854 مشاهده)
زمینه و هدف: نگهداری اسپرمها به صورت منجمد در نیتروژن مایع یک روش پرکاربرد برای حفظ طولانی مدت آنها است.بسیاری از این اسپرمها پس از ذوب شدن، آسیب دیده و زنده نمیمانند و بسیاری نیز قدرت تحرک خود را از دست میدهند. این آسیبها ناشی از آسیب به غشا اسپرم و تغییر نفوذپذیری به یونها به خاطر تغییرات فشار اسمزی، تشکیل کریستالهای یخ و افزایش تولید رادیکالهای آزاد اکسیژن است. هدف از این مطالعه تعیین رابطه بین غلظت کلسیم داخل سلولی و تولید رادیکالهای آزاد اکسیژن در اسپرماتوزوای تازه و منجمدـ ذوب شده انسان بود. روش بررسی: در این مطالعه نیمه تجربی که در سال 1392 انجام شد، تعداد 35 نمونه سیمن انسان بارور به طور تصادفی انتخاب و به دو گروه تازه و منجمدـ ذوب شده تقسیم شدند. اسپرمهای گروه دوم به روشهای استاندارد انجماد برای یک ماه در نیتروژن مایع نگهداری شدند. اسپرمهای تازه و اسپرمهای منجمد، پس از ذوب شدن در معرض 10 میکرومولار اینوفور کلسیم (A23187) قرار گرفتند. میزان تحرک، بقا و وضعیت آکروزوم در هر دو گروه در شروع آزمایش و بعد از قرار گرفتن در معرض اینوفور کلسیم بررسی شد. محتوای کلسیم داخل سلول، با روش فلوسیتومتری و استفاده از رنگ فلوروسنت Flou-3/AM و میزان تولید رادیکالهای آزاد اکسیژن با استفاده از لومینول و با روش کمی لومینیسنس ارزیابی شد. دادههای جمعآوری شده با آزمونهای منـ ویتنی و پیرسون تجزیه و تحلیل شدند. یافتهها:درصد کل اسپرمهای زنده، متحرک و پیشرونده و درصد اسپرمهای با آکروزوم سالم پس از پروسه انجمادـ ذوب به طور معنیداری کاهش یافت. افزودنA23187 به محیط سبب افزایش کلسیم داخل سلولی اسپرمهای زنده شد، اما درصد اسپرمهای زنده و متحرک هر دو گروه را کم کرد. تولید رادیکالهای آزاد اکسیژن را به ازای سلولهای زنده در هر دو گروه بیشتر کرد، ولی این افزایش در گروه منجمدـ ذوب شده به طور معنیداری از گروه تازه بیشتر بود(001/0p<). نتایج وجود یک رابطه مثبت معنیدار بین کلسیم داخل سلولی و تولید رادیکالهای آزاد اکسیژن را نشان داد. نتیجهگیری: یون کلسیم برای عملکرد طبیعی اسپرم لازم است، اما افزایش ورود کلسیم به وسیلهA23187 به اسپرمهای تازه یا منجمد ـ ذوب شده، سبب آسیب بیشتر و کاهش حرکت و بقا میشود. میزان رادیکالهای آزاد اکسیژن رابطه مستقیم و معنیداری با کلسیم داخل سلولی دارد. آسیبهای ناشی از انجماد با مقادیر زیادتر کلسیم داخل سلولی تشدید میشوند و این مسئله ممکن است به خاطر افزایش تولید رادیکالهای آزاد اکسیژن باشد.
Iravanpour F, Keshtgar S, Ebrahimi B. The Relation between Intracellular Calcium Concentration and Reactive Oxygen Species Production in Fresh and Cryopreserved-Thawed Human Spermatozoa. armaghanj 2021; 26 (5) :729-743 URL: http://armaghanj.yums.ac.ir/article-1-3137-fa.html
ایروانپور فریده، کشتگر سارا، ابراهیمی بهاره. رابطه بین غلظت کلسیم داخل سلولی و تولید رادیکالهای آزاد اکسیژن در اسپرماتوزوای تازه و منجمدـ ذوب شده انسان. ارمغان دانش. 1400; 26 (5) :729-743