[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 24، شماره 4 - ( 6-1398 ) ::
جلد 24 شماره 4 صفحات 691-709 برگشت به فهرست نسخه ها
تشخیص اتصال پپتید ضد رگ‌زایی به سلول‌های HUVEC با استفاده از FITC
فهیمه امینی سپهر1 ، سید محسن اصغری1، مصطفی شوریان 2
1- گروه زیست شناسی، دانشگاه گیلان، رشت، گیلان، ایران
2- گروه زیست شناسی، دانشگاه گیلان، رشت، گیلان، ایران ، shourian@guilan.ac.ir
چکیده:   (468 مشاهده)
زمینه و هدف: رگ‌زایی تولید عروق خونی جدید از عروق موجود است. رگ­زایی وابسته به وجود تعادل بین فاکتورهای فعال کننده و مهار کننده آن است. اندواستاتین، یک قطعه 20 کیلو دالتونی از کلاژن XVIII و عضوی از گروه پروتئین­های مهار کننده رگ­زایی می­باشد که تکثیر و مهاجرت سلول‌های اندوتلیال و تشکیل ساختار لوله مانند را مهار می­کند. استفاده از روش­های رنگ سنجی به واسطه پروب­های فلورسنت به عنوان ردیاب، کاربرد گسترده‌ای دارد، لذا هدف از این مطالعه تعیین و تشخیص اتصال پپتید ضد رگ‌زایی به سلول‌های اندوتلیای بند ناف انسانی با استفاده از یک نشانگر فلورسنس بود.
 
روش بررسی: در این مطالعه تجربی قطعه 27 آمینواسیدی مربوط به دمین انتهای آمینوی پروتئین اندواستاتین، با FITC به عنوان یک نشانگر فلورسنس، نشانه‌گذاری شد. از روش کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون به وسیله سفادکس G10 برای جداسازی پپتیدهای اتصال یافته استفاده شد و در نهایت  به منظور تأیید اتصال FITC به پتید از روش FTIR استفاده شد. سلول‌های اندوتلیال بندناف انسانی بعد از کشت با پپتیدهای اتصال یافته به نشانگر تیمار شدند و با استفاده از میکروسکپ فلورسانس به منظور مشاهده اتصال پپتید به رسپتور خود بر روی سطح این سلول‌ها مطالعه گردید.
 
یافته‌ها: نتایج این مطالعه با میکروسکوپ فلورسانس اتصال این پتید ضد رگ‌زایی به گیرنده مخصوص خود بر روی سلول‌های اندوتلیال را تأیید می‌کند. جهت رسیدن به شرایط مناسب برای نشانه‌گذاری پپتیدها، شرایط مختلف آزمایشی از قبیل غلظت پپتید و FITC و زمان و دمای انکوبه شدن مورد بررسی قرار گرفت. FITCهای آزاد به وسیله روش کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون از نمونه‌های کانژوگه  FITC-peptideجدا شدند. سلول‌های اندوتلیال بند ناف انسانی (HUVEC) کشت داده شده با نمونه‌های کانژوگه FITC-peptide تیمار شد. سپس سلول‌ها تثبیت و به وسیله میکروسکوپ فلوئورسانس مطالعه شدند.
 
نتیجه‌گیری: در این تحقیق اتصال بین FITC، به عنوان یک پروب فلورسانس به پپتید در یک شرایط بهینه انجام شد. به علاوه نشان دادیم که این کمپلکس قابل جداسازی می‌باشد. از طرفی نتایج تحقیقات حاکی از این است که پپتید مشتق از اندواستاتین به نحو مؤثری به سلول‌های HUVEC متصل شده است. این روش راهکار درستی برای شناسایی این اتصال می‌باشد. اتصال پروب فلورسنت به پپتید می‌تواند به عنوان یک ابزار مولکولی مناسب برای مطالعات آینده در دو حوزه in vitro و in vivoاستفاده شود.
 
 
واژه‌های کلیدی: پپتید ضدرگ‌زایی، فلوئورسین ایزوتیوسیانات، سلول‌های اندوتلیال بندناف انسانی
متن کامل [PDF 3976 kb]   (45 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیوشیمی
دریافت: ۱۳۹۸/۱/۳۰ | پذیرش: ۱۳۹۸/۶/۱۱ | انتشار: ۱۳۹۸/۶/۳۰
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Amini Sepehr F, Asghari S, Shourian M. Diagnosis of Anti-Angiogenesis Peptide Binding to HUVECs Using FITC. Armaghane danesh. 2019; 24 (4) :691-709
URL: http://armaghanj.yums.ac.ir/article-1-2495-fa.html

امینی سپهر فهیمه، اصغری محسن، شوریان مصطفی. تشخیص اتصال پپتید ضد رگ‌زایی به سلول‌های HUVEC با استفاده از FITC. ارمغان دانش. 1398; 24 (4) :691-709

URL: http://armaghanj.yums.ac.ir/article-1-2495-fa.html



دوره 24، شماره 4 - ( 6-1398 ) برگشت به فهرست نسخه ها
ارمغان دانش Armaghane danesh
Persian site map - English site map - Created in 0.08 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 4071