fa بررسی مقایسه‌ای روش‌های سرولوژی با واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز جهت تشخیص آزمایشگاهی مخازن لیشمانیوز احشایی(سگ) تخصصي Special پژوهشي Research چکیده: مقدمه و هدف: لیشمانیوز احشایی سگ و سگ‌سانان به وسیله تک یاخته‌ای به ‌نام لیشمانیااینفانتوم ایجاد می‌گردد و بیماری زئونوتیک آندمیک در کشورهای حوزه مدیترانه و خاورمیانه از جمله ایران می‌باشد. میزان شیوع سرمی ‌بیماری در مناطق مختلف آب و هوایی ایران از 10 تا 37 درصد گزارش شده است. تشخیص عفونت در سگ‌سانان به ویژه سگ‌های فاقد علامت بالینی به منظور کنترل بیماری در انسان از اهمیت خاصی برخوردار است. لذا این مطالعه به منظور مقایسه روش‌های تشخیصی آگلوتیناسیون مستقیم و تست نواری دیپ‌استیک با واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز انجام شد. مواد و روش‌ها: این یک مطالعه از نوع فرآیند نتایج است که بر روی 71 قلاده سگ از 4 روستای آندمیک کالاآزار در شهرستان مشکین شهر در سال 1387 انجام شد. پس از گرفتن نمونه خون و پوست از سگ‌های تحت بررسی با روش‌های سرولوژی آگلوتیناسیون مستقیم، تست نواری دیپ‌استیک rK39 و روش ملکولی واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز مورد آزمایش قرار گرفتند. داده‌های جمع‌آوری شده با استفاده از نرم‌افزار SPSS و آزمون‌های آماری مک نیمار و تست کاپا تجزیه و تحلیل شدند. یافته‌ها: از 71 قلاده سگ مورد مطالعه؛ 15 قلاده (1/21 درصد) دارای علایم بالینی و 56 قلاده (9/78 درصد) فاقد علامت بالینی، 17 قلاده (9/23 درصد) با روش آگلوتیناسیون مستقیم دارای تیتر بیشتر یا مساوی1:320، 22 قلاده (31 درصد) در روش دیپ‌استیکrk39 مثبت، با واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز پوست 21 قلاده (6/29درصد) و خون31 قلاده(7/43 درصد) مثبت بودند و در مجموع 38 قلاده (5/53 درصد) با تست واکنش زنجیره‌ای پلی مراز بر روی نمونه‌های پوست و یا خون آن‌ها مثبت شدند. بیشترین توافق بین روش آگلوتیناسیون مستقیم و دیپ استیک دیده و کمترین همخوانی بین آگلوتیناسیون مستقیم با واکنش زنجیره‌ای پلی مراز پوست و یا خون مشاهده گردید. نتیجه‌گیری: با توجه به نتایج این مطالعه روش آگلوتیناسیون مستقیم به دلیل شناسایی بهتر سگ‌های آلوده فاقد علامت و همچنین قابل انجام بودن در شرایط میدانی نسبت به سایر روش‌های مورد مطالعه برتری دارد و روش واکنش زنجیره‌ای پلی مراز برای ردیابی دی ان ای انگل در نمونه پوست سگ‌ها مناسب‌تر است. واژه‌های کلیدی: آگلوتیناسیون مستقیم، دیپ‌استیک ، واکنش زنجیره‌ای پلی مراز، لیشمانیوز احشایی، سگ ABSTRACT: Introduction & Objective: Canine visceral leishmaniasis (CVL) caused by Leishmania Infantum is endemic in most Mediterranean basin and its seroprevalence ranges from 10 to 37%. Diagnosis of Infection is very important especially in asymptomatic dogs for control of human leishmaniasis for control of human visceral leishmaniasis. This study was aimed to compare three methods for detection of canine visceral leishmaniosis. Materials & Methods: In this research process study, 71 dogs were selected from 4 endemic villages in Meshkin-Shahr district. Peripheral blood samples were tested by serologic (DAT and Dipstick rK39) and molecular (PCR) methods. Skin samples were tested by molecular (PCR) methods. Twelve samples of PCR products were sequenced that all of them were identified as Leishmania infantum and 2 nucleotide sequence data submitted to the GenBank database. Results: From 71 dogs that were studied, 21.1% were symptomatic and others were asymptomatic(78.9%). 17 dogs (23.9%) had ≥ 1:320 titer of antibody by direct agglutination test (DAT). Twenty two dogs(31%) were positive by Dipstick rK39 test, 21 dogs (29.6%) were positive by PCR on skin samples, 31 dogs (43.7%) were positive in blood PCR and 38 dogs (53.5%) were positive by skin/blood PCR. The highest correlation was between DAT and Dipstick test (76%). Conclusion: According to the results of this study, we can diagnose infection in symptomatic and asymptomatic dogs by DAT as a suitable method and PCR is suitable to follow parasite DNA in skin and other tissues of dogs. Keywords: Direct Agglutination Test(DAT), Dipstick rK39, PCR, Visceral Leishmaniosis, Dog واژه‌های کلیدی: آگلوتیناسیون مستقیم, دیپ‌استیک , واکنش زنجیره‌ای پلی مراز, لیشمانیوز احشایی, سگ Keywords: Direct Agglutination Test(DAT), Dipstick rK39, PCR, Visceral Leishmaniosis, Dog 31 42 http://armaghanj.yums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-430&slc_lang=fa&sid=1 A Moshfe دکتر عبدالعلی مشفع 10031947532846003001 10031947532846003001 No Z Zarei ذبیح الله زارعی 10031947532846003002 10031947532846003002 No B Akhoundi بهناز آخوندی 10031947532846003003 10031947532846003003 No GH Edrissian دکتر غلامحسین ادریسیان 10031947532846003004 10031947532846003004 No B Kazemi دکتر بهرام کاظمی 10031947532846003005 10031947532846003005 No SH Jamshidi دکتر شهرام جمشیدی 10031947532846003006 10031947532846003006 No M Mahmoudi دکتر محمود محمودی 10031947532846003007 10031947532846003007 No M Bandehpour دکتر مژگان بنده پور 10031947532846003008 10031947532846003008 No M Mohebali دکتر مهدی محبعلی : mohebali@tums.ac.ir 10031947532846003009 10031947532846003009 Yes