Armaghane Danesh

fa ترکیب داروهای اگزالی پلاتین و دیکلوفناک بر بیان ژن‌های کاسپاژ 8 و 9 در رده سلولی سرطانی کولورکتال(SW480) Evaluation the Effects of Diclofenac and Oxaliplatin on the Expression of Caspase8 and Caspase9 Genes in Colorectal Cancer Cell Line(SW480) تخصصي Special پژوهشي Research زمینه و هدف :<a name="_Hlk61207304">القای آپوپتوز</a> یکی از اهداف اساسی در تولید داروهای ضدسرطان است. ارزیابی ارتباط بین داروهای ضدالتهاب غیر استروییدی(NSAID) و آپوپتوز در سلول‌های سرطانی امیدوار کننده است. لذا هدف از این مطالعه تعیین ترکیب داروهای اگزالی پلاتین و دیکلوفناک بر بیان ژن‌های کاسپاژ 8 و 9 در رده سلولی سرطانی کولورکتال(SW480) با استفاده از دستگاه Real Time PCR بود.   روش بررسی: در این تحقیق تجربی که در سال 1399 انجام شد، سلول‌های سرطانی کولورکتال رده SW480 با غلظت‌های مختلف از اگزالی پلاتین و دیکلوفناک و هم‌چنین ترکیبی توأم از دیکلوفناک و اگزالی پلاتین تیمار شدند. جهت بررسی زنده مانی سلول‌ها از روش MTT استفاده شد و غلظت مهار میانه(IC50 ) برای هر گروه به دست آمد و جهت ارزیابی بیان ژن‌های  Caspase8و caspase9 از روش ریل تایم پی‌سی‌آر استفاده شد. داده‌های جمع‌اوری شده با استفاده از نرم‌افزار SPSS و آزمون آماری روش واریانس یک طرفه و آزمون تی تجزیه و تحلیل شدند.   یافته‌ها: در تیمار اگزالی پلاتین بر سلول‌های SW480، غلظتهای 25، 50، 100 و 200 میکروگرم بر میلی‌لیتر به طور معنی‌داری باعث کاهش زندهمانی این رده ﺳﻠﻮﻟﯽ نسبت به کنترل شدند(001/0p<) و غلظت مهار میانه 65 میکروگرم بر میلی‌لیتر محاسبه شد. در تیمار سلول‌ها با دیکلوفناک نیز غلظتهای 250، 500 و 1000 میکروگرم بر میلی‌لیتر به طور بسیار معنی‌داری باعث کاهش زندهمانی این رده ﺳﻠﻮﻟﯽ نسبت به کنترل شدند (001/0p<)<a name="_Hlk103627633">.</a> غلظتهای 5، 12، 25، 50، 100 و 200 میکروگرم بر میلی‌لیتر از اگزالی پلاتین در ترکیب با 250 میکروگرم از دیکلوفناک به طور بسیار معنی‌داری باعث کاهش زندهمانی این رده ﺳﻠﻮﻟﯽ نسبت به کنترل شدند(001/0p<) و غلظت مهار میانه اﮔﺰاﻟﯽ ﭘﻼﺗﯿﻦ  همراه شده با دیکلوفناک، معادل با 32 میکروگرم بر میلی‌لیتر محاسبه شد. هم‌چنین تیمار توام دیﮑﻠﻮﻓﻨﺎک و اﮔﺰاﻟﯽ ﭘﻼﺗﯿﻦ منجر به افزایش بسیار معنیدار بیان ژن ﮐﺎﺳﭙﺎز 8 و9 شد(001/0p<). به طوری که بیان ژن ﮐﺎﺳﭙﺎز 8 حدود 7/3  و ﮐﺎﺳﭙﺎز 9 حدود 8/1 برابر نسبت به کنترل در این آزمایش افزایش یافت.   نتیجه‌گیری: دیکلوفناک به همراه اگزالی پلاتین می تواند موجب اثرات سایتوتوکسیک بیشتری در مقایسه با استفاده از اگزالی پلاتین به تنهایی  در سلول‌های سرطانی SW480 شود. ترکیب توأم دیکلوفناک و اگزالی پلاتین با افزایش بیان  ژن کاسپاز 8 و9 همراه بوده و بر این اساس بررسی احتمالی کاربرد داروی دیکلوفناک به همراه اگزالی پلاتین در درمان سرطان کولون حایز اهمیت است.     Background & aim: Apoptosis induction is one of the basic goals in the production of anticancer drugs. Evaluation of the relationship between non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAID) and apoptosis in cancer cells is promising. Therefore, the aim of the present study was to determine the combination of oxaliplatin and diclofenac drugs on the expression of caspase 8 and 9 genes in colorectal cancer cell line (SW480) using Real Time PCR.   Methods: In the present experimental study conducted in 2019, SW480 colorectal cancer cells were treated with different concentrations of oxaliplatin and diclofenac, as well as a combination of diclofenac and oxaliplatin. The MTT method was used to check cell viability and the median inhibitory concentration (IC50) was obtained for each group, and the real-time PCR method was used to evaluate the expression of Caspase 8 and Caspase 9 genes. The collected data were analyzed using SPSS software and one-way variance statistical test and t-test.   Results: In oxaliplatin treatment with SW480 cells, concentrations of 25, 50, 100 and 200 μg / ml significantly reduced the viability of this category compared to the control (p<0.001). And median inhibition concentration of 65 μg / ml was calculated. In the treatment of cells with diclofenac, concentrations of 1000,500,250 μg / ml significantly reduced the viability of this category compared to controls (p<0.001), concentrations of 12.5, 25, 50, 100 and 200 μg / ml. Oxaliplatin in combination with 250 μg of diclofenac significantly reduced the viability of this class compared to the control (p<0.001) and the median inhibition concentration calculated with diclofenac equivalent to 32 μg / ml.Also, the combined treatment of diclofenac and Oxaliplatine led to a very significant increase in the expression of genes caspase8 and caspase9. (p<0.001) so that the expression of Caspase 8 gene increased about 3.7 times and Caspase9 expression increased about 1.8 times compared to the control in this experiment.   Conclusion: Diclofenac in combination with oxaliplatin can cause more cytotoxic effects compared to oxaliplatin alone in sw480 cancer cells. And if these two drugs are combined, a lower dose of oxaliplatin is needed to achieve this goal. The combination of diclofenac and oxaliplatin is associated with increased expression of caspase 8 and caspase 9 genes.As a result, it is essential to investigate the possible use of diclofenac with oxaliplatin in the treatment of colon cancer.     آپوپتوز, اگزالی پلاتین, دیکلوفناک, سرطان کولورکتال, کاسپاز Apaptosis, Caspase, Colorectal ancer, Diclofenac, Oxaliplatin 305 320 http://armaghanj.yums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1953-4&slc_lang=fa&sid=1 M Hashemzadeh مونا هاشم زاده mona.hashemzadeh973@gmail.com 100319475328460025949 100319475328460025949 No Department of Basic Sciences, Faculty of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Tehran Medical Sciences, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه علوم پایه، دانشکده داروسازی و علوم دارویی، علوم پزشکی تهران، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران T Naji طاهره ناجی tnaji2002@gmail.com 100319475328460025950 100319475328460025950 Yes Department of Basic Sciences, Faculty of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Tehran Medical Sciences, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه علوم پایه، دانشکده داروسازی و علوم دارویی، علوم پزشکی تهران، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران R Ahmadi رحیم احمدی drrahahmadi@yahoo.com 100319475328460025951 100319475328460025951 No Department of physiology, Hamedan Branch, Islamic Azad University, Hamedan, Iran. گروه فیزیولوژی، واحد همدان، دانشگاه آزاد اسلامی، همدان، ایران