fa بررسی اثر فنوتیپی و ژنوتیپی اسانس الکلی مرزه خوزستانی و نانوکمپلکس مس بر بیان ژن آلکالین پروتئاز در پسودوموناس آئروژینوزا به روش RT-PCR میکروبیولوژی Microbiology پژوهشي Research <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">زمینه و هدف:</span></span></span></strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> <em>پسودوموناس آئروژینوزا</em> یک باسیل گرم منفی وپاتوژن فرصت‌طلب بوده که در بیماران با نقص سیستم ایمنی مرگ و میر بالایی ایجاد می‌کند. عمده فعالیت ضدمیکروبی اسانس مرزه خوزستانی به دلیل اجزای فنلی کارواکرول است. نانومواد به دلیل سمیت کم برای مبارزه با میکروب‌های بیماری‌زا می‌توانند انتخاب مناسبی باشند. هدف این مطالعه تعیین و بررسی تأثیر اسانس الکلی مرزه خوزستانی و نانوکمپلکس مس بر بیان ژن آلکالین پروتئاز <em>پسودوموناس آئروژینوزا</em> بوده است.</span></span></span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">روش بررسی:</span></span></span></strong> <span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"><span style="font-size: medium;">در این مطالعه نیمه‌تجربی که در سال1393 انجام شد، سویه‌های <em>پسودوموناس آئروژینوزا</em> از بیماران سوختگی در اهواز جداسازی شد و از طریق تست‌های استاندارد میکروبشناسی از قبیل؛ رنگ‌آمیزی گرم، کاتالاز، اکسیداز و تست اکسیداسیون بر فرمانتاسیون، تولید پیگمان و رشد در دمای </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">˚c</span></span></span></span><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"><span style="font-size: medium;">42 تعیین هویت شدند. </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">مطالعه با روش رقت‌سازی میزان حداقل غلظت مهاری(</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">MIC</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">) اسانس و نانوکمپلکس علیه سویه‌های به دست آمد. پس از مواجهه با غلظت </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">MIC</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">، تغییرات بیان ژن آلکالین پروتئاز به روش </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">RT-PCR</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> مورد بررسی قرار گرفت. درصد حیات سویه های مورد مطالعه در حضور غلظت های مختلف اسانس و نانوکمپلکس با روش</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">MTT ASSAY</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> تعیین شد. داده‌ها با استفاده از </span></span></span><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"><span style="font-size: medium;">آزمون‌های آماری کروسکال والیس و تست تعقیبی شفه، فیشر، آنالیز واریانس و کولموگروف اسمیرنف تجزیه و تحلیل شدند.</span></span></span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">یافته‌ها:</span></span></span></strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> میزان </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">MIC</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> اسانس برای سویه استاندارد و بالینی <em>پسودوموناس آئروژینوزا</em> به ترتیب 4و8 میکروگرم بر میلی‌لیتر و میزان </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">MIC</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> نانوکمپلکس مس برای سویه استاندارد و بالینی <em>پسودوموناس آئروژینوزا</em> به ترتیب 25 و 50 میکروگرم بر میلی‌لیتر بوده است. مشخص شد که اسانس و نانوکمپلکس در غلظت </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">MIC</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> &nbsp;دارای اثر مهاری علیه بیان ژن آلکالین پروتئاز بوده‌اند.</span></span></span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">نتیجه‌گیری:</span></span></span></strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> نتایج به دست آمده نشان می‌دهد که مرزه خوزستانی اثر ضد میکروبی و مهار بیان ژنی بیشتری نسبت به نانوکمپلکس بر روی ژن آلکالین پروتئاز دارد.&nbsp;</span></span></span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">&nbsp;</span></span></span></strong> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal; unicode-bidi: embed; direction: ltr;"><b><span style="color: black; font-family:;">&nbsp;</span></b></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal; unicode-bidi: embed; direction: ltr;"><b><span style="color: black; font-family:;">Background & aim: </span></b><i><span style="background: white; color: black; font-family:;">Pseudomonas aeruginosa</span></i><span style="background: white; color: black; font-family:;"> is a gram-negative bacillus and an opportunistic pathogen that causes high mortality in immunocompromised patients. The main antimicrobial activity of&nbsp;</span><em><span style="color: black; font-family:;">Satureja khuzestanica</span></em><span style="background: white; color: black; font-family:;">&nbsp;essence is due to carvacrol phenolic components. Nanomaterials can be a good choice because of low toxicity to fight pathogenic microbes. The aim of this study was to evaluate the effect of </span><em><span style="color: black; font-family:;">Satureja khuzestanica</span></em><span style="background: white; color: black; font-family:;">&nbsp;essence and copper nanocomplex on the expression of alkaline protease gene in <i>Pseudomonas aeruginosa.</i></span></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal; unicode-bidi: embed; direction: ltr;"><br> <span style="color: black; font-family:;"><b><span style="background: white;">Methods: </span></b><span style="background: white;">In this study, minimum inhibitory concentration (MIC) of essence and nanocomplex were detected against the strains by microdilution broth method. After exposure to MIC concentration, the alteration of alkaline protease gene expression by RT-PCR was investigated. The viability percentage was determined by MTT assay method in the presence of essence and nanocomplex</span><span dir="RTL" lang="FA">.</span></span></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal; unicode-bidi: embed; direction: ltr;"><br> <span style="color: black; font-family:;"><b><span style="background: white;">Results: </span></b><span style="background: white;">The MIC of essence for standard and clinical <i>p<span dir="RTL" lang="FA">.</span> aeruginosa </i>strains was 4 and 8 &mu;g/ml respectively, and the MIC for the standard and clinical <i>p<span dir="RTL" lang="FA">.</span> aeruginosa </i>strains was 25 and 50&mu;g/ml, respectively. It was found that essence and nanocomplex in MIC concentration had an inhibitory effect on the expression of alkaline protease gene.</span></span></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal; unicode-bidi: embed; direction: ltr;"><br> <span style="color: black; font-family:;"><b><span style="background: white;">Conclusion: </span></b><span style="background: white;">The results showed that the essence has a stronger antimicrobial and inhibitory effect on the expression of alkaline protease gene than the nanocomplex.</span></span></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal; unicode-bidi: embed; direction: ltr;"><span style="background: white; color: black; font-family:;">&nbsp;</span></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal; unicode-bidi: embed; direction: ltr;"><span style="background: white; color: black; font-family:;">&nbsp;</span></p> پسودوموناس آئروژینوزا, نانوکمپلکس مس, اسانس مرزه خوزستانی, آلکالین پروتئاز Pseudomonas Aeruginosa, RT-PCR, Copper Nanocomplex, Satureja Khuzestanica essence, Alkaline Protease 226 237 http://armaghanj.yums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1522-1&slc_lang=fa&sid=1 R Mohseni راضیه محسنی Raziemohseni2014@gmail.com 100319475328460017871 100319475328460017871 No Department of Microbiology, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran گروه میکروب‌شناسی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران SA Khosravani عبدالمجید خسروانی Khosravani2us@yahoo.com 100319475328460017872 100319475328460017872 Yes Department of Microbiology, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran گروه میکروب‌شناسی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران A Sharifi اصغر شریفی asgharsharifi@yahoo.com 100319475328460017873 100319475328460017873 No Department of Microbiology, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran گروه میکروب‌شناسی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران O Eilami اورنگ ایلامی 100319475328460017874 100319475328460017874 No Department of Microbiology, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran گروه میکروب‌شناسی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران SS Khorramrooz سجاد خرم روز Khoramrooz@yahoo.com 100319475328460017875 100319475328460017875 No Department of Microbiology, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran گروه میکروب‌شناسی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران M Mollaqagh Zarandi معصومه ملاآقا زرندی 100319475328460017876 100319475328460017876 No Iran, Deputy for Education Ministry of Health and Medical Education وزارت بهداشت درمان و آموزش پزشکی F Meridi Kia فروغ مریدی‌کیا 100319475328460017877 100319475328460017877 No Department of Microbiology, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran گروه میکروب‌شناسی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران