fa تأثیر آپوپتوتیک عصاره گیاه سنبله‌ای کرکدار(Stachys pilifera Benth) روی سلول‌های سرطان کلورکتال رده HT-29 بیوشیمی Biochemistry پژوهشي Research &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">زمینه و هدف:</span></span></span></strong> <span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">در طب سنتی</span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> از گیاه سنبله‌ای کرکدار</span></span></span> <span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">برای درمان انواع بیماری‌ها استفاده می‌شود. علی‌رغم برخی گزارش‌ها در مورد اثرات ضد توموری برخی از گونه‌های این جنس، فعالیت ضد سرطان</span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> سنبله‌ای کرکدار</span></span></span> <span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">هنوز گزارش نشده است. </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:25"><span style="color: rgb(0, 128, 128);">هدف از ا</span></ins>ی<span style="color: rgb(0, 128, 128);"><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:25">ن </ins><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26">م</ins><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:25">طالعه</ins></span> </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);">بررس</span></ins>ی<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);"> اثر آپوپتوز</span></ins>ی<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);"> عصاره سنبله</span></ins>‌<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);">ا</span></ins>ی<span style="color: rgb(0, 128, 128);"><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"> کرکدار</ins><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:27">(</ins></span></span></span></span><span style="color: rgb(0, 128, 128);"><em><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:27">Stachys pilifera Benth</ins></span></span></span></em><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:27">)</ins></span></span></span> <span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);">و فرکشن آلکالوئ</span></ins>ی<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);">د</span></ins>ی<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);"> و ترپنوئ</span></ins>ی<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);">د</span></ins>ی<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);"> آن در سلول</span></ins>‌<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);">ها</span></ins>ی<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);"> سرطان</span></ins>ی<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);"> کولورکتال </span></ins></span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:26"><span style="color: rgb(0, 128, 128);">HT-29</span></ins></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> می‌<ins cite="mailto:panahi" datetime="2019-04-27T12:28"><span style="color: rgb(0, 128, 128);">باشد. </span></ins></span></span></span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">روش بررسی:</span></span></span></strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> در این مطالعه تجربی سلول‌های </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">HT-29</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> کشت شد و سپس سلول‌ها با غلظت‌های مختلف عصاره متانولی سنبله‌ای کرکدار، فرکشن‌های آلکالوئیدی و ترپنوئیدی و سیس پلاتین به مدت 24 ساعت <ins cite="mailto:DOOSTI" datetime="2018-06-20T11:27"><span style="color: rgb(0, 128, 128);">انکوبه </span></ins>شدند. </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">بقای</span></span></span> <span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">سلول&shy;های سرطانی با استفاده از آزمون</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">(MTT)</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> اندازه‌گیری شد. اثرات عصاره و تست‌های انجام شده بر روی مکانیزم‌های مرگ و میر سلولی مانند قطعه قطعه شدن</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">DNA</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> و آپوپتوز به وسیله دستگاه فلوسیتومتری انجام شد. سیس پلاتین به عنوان کنترل مثبت در این مطالعه مورد استفاده قرار گرفت. داده‌های جمع‌آوری شده با استفاده از آزمون‌های آماری آنالیز واریانس یک طرفه </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">و </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">تست تعقیبی توکی تجزیه و تحلیل شدند. </span></span></span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">یافته&shy;ها: </span></span></span></strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">نتایج </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">IC₅₀</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> عصاره متانولی، فرکشن‌های آلکالوئیدی، ترپنوئیدی و سیس پلاتین بر روی سلول </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">HT-29</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> بعد از 24 ساعت </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">به ترتیب برابر 612.8، 46.4، 46.8 و 4.06 میکروگرم بر میلی‌لیتر بود</span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">. نتایج نشان داد که مهار تکثیر سلولی به صورت وابسته به دوز می‌باشد. عصاره متانولی سنبله‌ای کرکدار و سیس پلاتین باعث قطعه قطعه شدن </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">DNA</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> &nbsp;شدند. نتایج تست آپوپتوز نشان داد که بیشترین درصد افزایش آپوپتوز در تیمار با سیس پلاتین( </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">8/30 درصد)</span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> و عصاره متانولی(2/23درصد) نسبت به گروه کنترل(تیمار نشده) بود(05/0</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">p<</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">)</span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">.</span></span></span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">نتیجه‌گیری:</span></span></span></strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> عصاره هیدروالکلی </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">سنبله&shy;ای کرکدار</span></span></span> <span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">و فراکشن الکالوئیدی به صورت وابسته به دوز تکثیر سلول‌های سرطانی </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">کلورکتال </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: arial,sans-serif;"><span style="color: black;">HT-29</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> را متوقف و سلول‌‌‌ها را وارد فاز آپوپتوتیک می‌کند. بنابراین گیاه کاندیدای مناسبی برای جلوگیری از تکثیر سلوا‌های سرطانی کلورکتال می‌تواند باشد.</span></span></span><br> &nbsp;<br> <span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">سنبله</span></span></span> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal;"><b><span style="color: black; font-family:;">Background & aim<i>:</i></span></b><i><span style="color: black; font-family:;"> Stachys pilifera Benth</span></i><span style="color: black; font-family:;"> (Lamiaceae) is used in traditional medicine to treat a variety of diseases. Despite some reports on the antitumor effects of some species of this genus, anticancer activity of <i>Stachys pilifera</i> has not been yet reported. In the present study, the researchers examined the cytotoxic effect and cell death mechanisms of methanolic extract of <i>Stachys pilifera</i> and its alkaloid and terpenoid fractions on the HT-29 colorectal cell line.</span></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal;"><b><span style="color: black; font-family:;">&nbsp;</span></b></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal;"><b><span style="color: black; font-family:;">Methods</span></b><span style="color: black; font-family:;">: In the present study, HT-29 cells were cultivated and afterwards incubated in the methanolic extract of <i>Stachys pilifera</i> and its fractions at various concentrations for 24 hours. Cell viability was measured by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. The effects of the extract and the tests performed on cell death mechanisms such as fragmentation of DNA and apoptosis were performed by flow cytometry. Cisplatin was used as the positive control. The collected data was analyzed by ANOVA and Tukey test<ins cite="mailto:DOOSTI" datetime="2018-06-20T12:07"><font color="#008080">.</font></ins></span></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal;"><span style="color: black; font-family:;">&nbsp;</span></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal;"><b><span style="color: black; font-family:;">Results:</span></b><span style="color: black; font-family:;"> The results of IC50 of methanolic extract, alkaloid, tropenoid, and cisplatin on HT-29 cells after 24 hours were 612.8, 46.4, 46.8 and 4.06 &mu;g / ml, respectively. The results indicated that the inhibition of cell proliferation was dose-dependent. The methanolic extracts of </span><i><span style="color: black; font-family:;">Stachys</span></i><span style="color: black; font-family:;"> and cisplatin resulted in DNA fragmentation. The results of apoptosis test revealed that the highest percentage of apoptosis was observed in cisplatin (30.8%) and methanolic extracts (23.2%) than the control (untreated) group (P <0.05).</span></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal;"><b><span style="color: black; font-family:;">&nbsp;</span></b></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: normal;"><b><span style="color: black; font-family:;">Conclusion:</span></b><span style="color: black; font-family:;"> These findings provide a basis for the therapeutic potential of S. pilfera in the treatment of colon cancer<ins cite="mailto:DOOSTI" datetime="2018-06-20T12:08"><font color="#008080">.</font></ins></span></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; line-height: normal;"></p> <p style="margin: 0cm 0cm 0pt; text-align: justify; line-height: 150%;"><span dir="RTL" lang="FA" style="color: black; line-height: 150%; font-family:;">&nbsp;</span></p> ‌ای کرک‌دار, آپوپتوز, قطعه قطعه شدن دی ان ای Stachys pilifera, apoptosis, DNA fragmentation and HT- 29 17 30 http://armaghanj.yums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-596-1&slc_lang=fa&sid=1 E Panahi Kokhdan اسماعیل پناهی کوخدان esmaeel_panahi@yahoo.com 100319475328460019026 100319475328460019026 No Department of Biology, University of Guilan, Rasht, Iran گروه زیست شناسی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران H Sadeghi حسین صادقی h_sadeghi_m@yahoo.com 100319475328460019027 0089-8098-9890-0890 No Medicinal Plants Research Center, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran مرکز تحقیقات گیاهان دارویی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران H Ghafoori حسین غفوری ar_asfaram@yahoo.com 100319475328460019028 100319475328460019028 No Department of Biology, University of Guilan, Rasht, Iran گروه زیست شناسی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران H Sadeghi هیبت الله صادقی arasfaram@gmail.com 100319475328460019029 9808-9800-3252-2313 No Medicinal Plants Research Center, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran مرکز تحقیقات گیاهان دارویی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران N Danaei نازنین دانایی danaei.nazanin@gmail.com 100319475328460019030 6756-3463-9089-0012 No Medicinal Plants Research Center, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran مرکز تحقیقات گیاهان دارویی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران SH Salaminia شیراوان سلامی‌نیا 100319475328460019031 100319475328460019031 No Medicinal Plants Research Center, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran مرکز تحقیقات گیاهان دارویی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران MR Aghamaali محمود رضا آقا معالی ar_asfaram@yu.ac.ir 100319475328460019032 9097-2334-3524-8796 Yes Department of Biology, University of Guilan, Rasht, Iran گروه زیست شناسی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران