fa تکثیر سلول‌های فیبروبلاست بر داربست کیتوزان در حضور هیالورونیک اسید عمومى General پژوهشي Research <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">زمینه و هدف:</span></span></span></strong> <span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">مهندسی بافت روش جدیدی برای جایگزینی اجزاء بافت تخریب شده به وسیله پلیمرهای زیست تخریب‌پذیر می‌باشد که به صورت داربستی سه بعدی برای رشد و تکثیر سلول‌های بنیادی تهیه می‌گردد. به این منظور</span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> در این مطالعه</span></span></span> <span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">از داربست کیتوزان استفاده شد </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">تا در حضور هیالورونیک اسید، میزان تکثیر سلول‌های فیبروبلاست مورد ارزیابی قرار گیرد.</span></span></span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">&nbsp;روش بررسی:</span></span></span></strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> در این مطالعه تجربی &nbsp;از پودرکیتوزان، داربستی جهت رشد سلول‌های فیبروبلاست تهیه گردید.</span></span></span> <span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">سپس جهت مطالعه‌های بعدی گروه‌های زیر طراحی شدند؛ </span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">گروه1: داربست کیتوزان با هیالورونیک اسید، گروه 2: داربست کیتوزان بدون هیالورونیک اسید، گروه 3(کنترل1): سلول فیبروبلاست با &nbsp;هیالورونیک اسید و گروه 4 (کنترل2): سلول فیبروبلاست بدون&nbsp; هیالورونیک اسید. پوست ختنه‌گاه انسان تهیه و سلول‌های فیبروبلاست موجود در لایه درم آن پس از انجام مراحل تکنیک‌‌های آزمایشگاهی، جداسازی و سلول‌ها به همراه محیط کشت </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">DMEM</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> به فلاسک‌های کشت منتقل ودر انکوباتور </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 8pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">CO₂</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> دار نگهداری شدند. پس از چند بار پاساژسلولی، ده هزارسلول در چاهک‌های 96 خانه ای حاوی محیط کشت </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 7pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">DMEM</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> منتقل و</span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> با استفاده از روش </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 7pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">MTT</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> و رنگ‌آمیزی </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 7pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">DAPI</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> ، تکثیر سلول های فیبروبلاست بر روی داربست کیتوزان بررسی گردید. نتایح به دست آمده پس از بررسی یکنواختی داده‌ها با استفاده از آزمون‌های آنوا و تست تعقیبی توکی نرم افزارگراف پد مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.</span></span></span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">یافته‌ها : </span></span></span></strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">میانگین تست </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">MTT</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> در داربست کیتوزان بدون هیالورونیک اسید در 24 ساعت در مقایسه با گروه‌های کنترل با و بدون هیالورونیک اسید و گروه کیتوزان با هیالورونیک اسید افزایش آماری معنی‌دار نشان داد(012/0</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">p<</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">) مقدار </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">P</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">یقا نوشته شود. میانگین تست </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">MTT</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> در گروه کنترل بدون هیالورونیک اسید در 48 ساعت در مقایسه با&nbsp; گروه داربست کیتوزان با و بدون هیالورونیک اسید و گروه کنترل با&nbsp; هیالورونیک اسید افزایش آماری معنی‌دار نشان داد(004/0</span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">p<</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">) مقدار </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: times new roman,serif;"><span style="color: black;">P</span></span></span></span><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">یقا نوشته شود. میانگین بقاء در داربست کیتوزان با و بدون هیالورونیک اسید در 72 ساعت در مقایسه با گروه‌های کنترل با و بدون هیالورونیک اسید از نظر آماری معنی‌دار نبود. &nbsp;&nbsp;</span></span></span><br> &nbsp;<br> <strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;">نتیجه گیری :</span></span></span></strong><span style="font-size: 10pt;"><span style="font-family: yagut;"><span style="color: black;"> نتایج این تحقیق نشان داد که داربست های کیتوزان با استفاده از خواص هیدروفیلیک خودزیست سازگاری بهتری با سلول های فیبروبلاست داشتند، اما حضور اسید هیالورونیک با کیتوزان روند رشد فیبروبلاست را کاهش داد. به احتمال زیاد، کیتوزان به تنهایی در ساختارهایی که برای احیای مناطق آسیب دیده پوست استفاده می شود، یک داربست مناسب برای تکثیر سلول های فیبروبلاست آسیب دیده است.</span></span></span><br> &nbsp;<br> &nbsp; <strong>Background & Aim: </strong>Tissue engineering is a new method for the replacement of degraded tissue components by biodegradable polymers, which is provided as a three-dimensional scaffold for growth and proliferation of stem cells. In this study, chitosan scaffold was used to evaluate the proliferation of fibroblasts in the presence of hyaluronic acid.<br> <br> <strong>&nbsp;Methods:</strong> In this experimental study, powder scaffolds were prepared for growth of fibroblastic cells. The following groups were designed for later studies: Group 1: Chitosan scaffold with hyaluronic acid, Group 2: Chitosan without hyaluronic acid scaffold, Group 3 (control 1): Hyaluronic acid fibroblast cell and Group 4 (control 2): ​​Hyaluronic acid fibroblaster cell. The human foreskin was prepared and the fibroblasts of the dermal layer were removed after separation, and the cells were transferred to the culture flasks with DMEM medium and stored in a CO2-containing incubator. After several passages, 10,000 cells were transferred to 96 wells containing DMEM medium and MTT and DAPI staining method was used to amplify fibroblasts on the chitosan scaffold. The obtained results were analyzed by ANOVA and Tukey&#39;s post hoc test after uniformity of data analysis.<br> <br> <strong>Results:</strong> The mean survival rate of chitosan without hyaluronic acid scaffold in 24 hours was significantly higher than that of control with and without hyaluronic acid and chitosan group with hyaluronic acid (P <0.05). The mean survival in the control group without hyaluronic acid increased significantly in 48 hours compared to the chitosan scaffold with and without hyaluronic acid and the control group with hyaluronic acid (P <0.05). The mean survival time in chitosan scaffold with and without hyaluronic acid in 72 hours was not statistically significant compared to control groups with and without hyaluronic acid.<br> <br> <strong>Conclusion: </strong>Chitosan scaffold showed better biocompatibility with fibroblasts due to its hydrophilic property, but the presence of hyaluronic acid with chitosan reduced the fibroblast growth trend. Chitosan may be alone in structures that are synthesized to repair damaged areas of the skin, a good scaffold for proliferation of damaged fibroblast cells.<br> <br> <strong>&nbsp;</strong> کیتوزان ,داربست, سلول فیبروبلاست,هیالورونیک اسید Chitosan, Scaffold, Fibroblasts, Hyaluronic Acid, foreskin 134 145 http://armaghanj.yums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-30-1&slc_lang=fa&sid=1 SS Hashemi سیده سارا هاشمی sara_hashemi 100319475328460019016 100319475328460019016 No Burning Research Center, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran مرکز تحقیقات سوختگی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران S Rajabi سیده سمیه رجبی alirezasafai9@gmail.com 100319475328460019017 100319475328460019017 No Student Research Committee, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران R Mahmoudi رضا محمودی rmahmoudi40@gmail.com 100319475328460019018 100319475328460019018 No Cellular and Molecular Research Center, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران A Ghanbari امیر قنبری amirghanbari52@yahoo.com 100319475328460019019 100319475328460019019 No Cellular and Molecular Research Center, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران M Jafari Barmak مهرزاد جعفری برمک mehrzadj14@gmail.com 100319475328460019020 100319475328460019020 Yes Cellular and Molecular Research Center, Yasuj University of Medical Sciences, Yasuj, Iran مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی یاسوج، یاسوج، ایران