Armaghane Danesh

fa بررسی موتاسیون ژن های grlA و norA در جدایه های بالینی استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به فلوروکینولون ها Mutations in grlA and norA Genes of Clinical Isolates of Staphylococcus aureus Resistant to Fluoroquinolone میکروبیولوژی Microbiology پژوهشي Research چکیده زمینه و هدف. فلوروکینولون‌ها دسته ای از آنتی‌بیوتیک‌های پرکاربرد و با طیف اثر وسیع هستند که مقاومت نسبت به آنها رو به گسترش است. از مکانیسم‌های مهم مقاومت به فلوروکوئینولون‌ها در استافیلوکوکوس اورئوس، موتاسیون درgrlA یک زیرواحد توپوایزومراز نوع II و موتاسیون پمپ افلاکس norA است. هدف از پژوهش حاضر بررسی موتاسیون ژن‌های grlA و norA در جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به آنتی‌بیوتیک‌های فلوروکینولون بود.   روش بررسی: در این مطالعه مقطعی، 85 جدایه استافیلوکوکوس اورئوس از نمونه‌های بالینی مختلف با استفاده از روش‌های کشت و مولکولی شناسایی گردید. مقاومت این جدایه‌ها به فلوروکینولون‌ها با روش انتشار از دیسک و MIC سیپروفلوکساسین، به روش براث ماکرودایلوشن تعیین شد. جهت  بررسی ارتباط بین موضع عفونت و وضعیت مقاومت به هر دارو از آزمون آماری مجذور کای بهره برده شد. برای معنی‌دار بودن نتایج لحاظ شد(05/0p<). موتاسیون در ناحیه تعیین کننده مقاومت به کینولون‌ها در ژن grlA و موتاسیون ژن norA سویه‌های مقاوم، از طریق تکثیر این ژن‌ها در واکنش PCR و بررسی توالی نوکلئوتیدی محصول، تعیین گردید.   یافته‌ها: در این بررسی 20 درصد جدایه‌ها به همه آنتی‌بیوتیک‌های فلوروکینولون مورد مطالعه مقاوم بودند. به کمک آزمون آماری مشخص شد که تفاوت معنی‌داری بین مقاومت به فلوروکینولون‌ها در جدایه‌های مورد مطالعه و محل عفونت استافیلوکوکوس اورئوس در مبتلایان وجود ندارد. MIC سیپروفلوکساسین در جدایه‌های مقاوم به فلوروکینولون بین512ـ32 میکروگرم در میلی‌لیتر متغیر بود. دو موتاسیون منفرد S80F و P144S و یک الگوی موتاسیون دوگانه S80F + P144S در ژن grlA سویه های مقاوم به فلوروکینولون استافیلوکوکوس اورئوس شناسایی گردید، ولی در ژن norA سویه‌های مقاوم هیچ موتاسیونی دیده نشد. هم‌چنین بین میزان MIC در جدایه های مقاوم به سیپروفلوکساسین و جهش در ژن grlA ارتباطی مشاهده نشد.   نتیجه‌گیری: جهش در ژن grlA یکی از مهم‌ترین مکانیسم‌های مقاومت به سیپروفلوکساسین در جدایه‌های بالینی استافیلوکوکوس اورئوس در رشت بوده اغلب و سویه‌های مقاوم، موتاسیون شایع در کدن 80 این ژن را کسب کرده‌اند.      Abstract   Background and aim: Fluoroquinolones are group of antibiotics that are commonly used as broad-spectrum and resistance to them is expanding. The mechanisms of resistance to fluoroquinolones in S. aureus is important in mutation a subunit of topoisomerase type II grlA and efflux pump. This study was aimed was to investigate mutations in grlA and norA genes of clinical isolates of S. aureus resistant to fluoroquinolones   Methods: In the present cross-sectional study, 85 S. aureus isolates from different clinical samples using culture and molecular methods were identified. The resistant of these isolates to fluoroquinolones was determined by disc diffusion method and MIC ciprofloxacin method was tested by macro dilution broth. To examine the relationship between infection and the position of each drug resistance status the chi-square test was used. A P value of < 0.05 was considered statistically significant.  Mutations in the quinolone resistance-determining regions (QRDR) in chromosomal grlA gene and norA gen mutations was investigated in quinolone-resistant S. aureus isolates, by PCR amplification of grlA and norA genes and sequencing. Results: In this study, 20% of isolates were resistant to all antibiotics fluoroquinolones studied. Using statistical analysis revealed no significant differences between fluoroquinolone resistance in isolates of S. aureus infection in patients and location was observed. MIC ciprofloxacin resistant isolates to fluoroquinolones was ranged between 32-512 mg/ml.   Two single mutations S80F and S80F and a pattern of P144S+ P144S in the grlA gene of fluoroquinolone resistant strains of S. aureus were identified, but no mutations were found in genes norA resistant strains. Also, no relationship between MIC of ciprofloxacin in resistant isolates and mutation in grlA was seen. Conclusion: The obtained results demonstrated that grlA gene mutation is one of the most important mechanisms of resistance to ciprofloxacin in clinical isolates of S. aureus in Rasht and most of resistant isolates acquired common mutation in codon 80.     فلوروکینولون, استافیلوکوس اورئوس, Fluoroquinolone, S. aureus, grlA, norA 1236 1246 http://armaghanj.yums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-913-1&slc_lang=fa&sid=1 L Asadpour لیلا اسدپور l.asadpour@yahoo.com 100319475328460012666 100319475328460012666 Yes Young Researchers and Elite Club, Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران S Veisi سعید ویسی saeed.veysi@gmail.com 100319475328460012667 100319475328460012667 No Young Researchers and Elite Club, Rasht Branch, Islamic Azad University, Rasht, Iran باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، واحد رشت، دانشگاه آزاد اسلامی، رشت، ایران